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原代細(xì)胞、細(xì)胞系和細(xì)胞株如何區(qū)分？

在細(xì)胞和基因治療的時(shí)代，細(xì)胞成為基礎(chǔ)。在商業(yè)的細(xì)胞時(shí)代，常有原代細(xì)胞、細(xì)胞系和細(xì)胞株，那這些原代細(xì)胞、細(xì)胞系和細(xì)胞株如何區(qū)分呢？它們都有什么作用呢？一、原代細(xì)胞原代細(xì)胞指的是直接從組織或器官中分離并初次培養(yǎng)的細(xì)胞。它們的傳代次數(shù)有限，通常只能傳代幾次到十幾次。原代細(xì)胞保持了體內(nèi)細(xì)胞的許多原始特性，因此非常適合用來研究細(xì)胞的基本功能和生理反應(yīng)。原代細(xì)胞的作用主要體現(xiàn)在在疾病模型建立、藥物篩選和毒性測試等領(lǐng)域。二、細(xì)胞系細(xì)胞系則是由原代細(xì)胞經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)而成的細(xì)胞群體。與原代細(xì)...

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細(xì)胞污染預(yù)防的種類和方法

細(xì)胞污染在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，非常常見。目前為止，防止細(xì)胞污染的首要手段是預(yù)防。細(xì)胞污染通常會(huì)出現(xiàn)在生物安全柜和培養(yǎng)箱這兩個(gè)地方，因此，如何做好這兩個(gè)地方的預(yù)防措施呢？一、所有進(jìn)入安全柜的東西都要盡可能保證無菌直接購買商用試劑和耗材是穩(wěn)定的方式，如Gibco、中科百抗的血清，Corning的耗材等，這些品牌的試劑和耗材一般只要是正品都可以保證無菌。若自己配制的試劑，那么在配制中需要嚴(yán)格按無菌操作進(jìn)行。二、分裝的試劑建議過濾一次試劑在分裝時(shí)可以考慮再用針頭式過濾器過濾一次，減少污染...

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細(xì)胞培養(yǎng)常用抗生素

抗生素在細(xì)胞培養(yǎng)中的使用可以最大限度地降低污染，從而降低細(xì)胞、試劑的費(fèi)用損失和時(shí)間損失。因此，細(xì)胞培養(yǎng)常用抗生素有哪些呢？一、嘌呤霉素鹽酸鹽Puromycin,Dihydrochloride嘌呤霉素(Puromycin)是一種氨基糖苷類抗生素，能有效抑制革蘭氏陽性菌生長，還能抑制原生生物、藻類、哺乳動(dòng)物和昆蟲細(xì)胞的生長，一般2天內(nèi)能殺死99%的細(xì)胞。二、鹽酸萬古霉素VancomycinHydrochloride鹽酸萬古霉素(Vancomycinhydrochloride)是一...

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分子實(shí)驗(yàn)中DNA連接酶的作用機(jī)制

DNA連接酶(DNAligases)是一類重要的酶，在DNA復(fù)制、修復(fù)和重組過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。一、ATP依賴性連接在真核生物的連接酶如DNA連接酶I中，連接反應(yīng)是ATP依賴性的。ATP的水解驅(qū)動(dòng)了DNA鏈的連接。連接反應(yīng)主要發(fā)生在DNA雙鏈斷裂的末端。T4DNA連接酶是典型的ATP依賴性連接：（1）原理與特點(diǎn)：T4DNA連接酶是一種來自噬菌體T4的連接酶，其主要原理是在DNA鏈斷裂的末端引入磷酸二酯鍵，將兩個(gè)DNA片段連接起來。它需要ATP作為輔助能量。（2）優(yōu)點(diǎn)：T4DN...

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分子實(shí)驗(yàn)中DNA連接酶的作用原理

DNA連接酶(DNAligases)是一類重要的酶，在DNA復(fù)制、修復(fù)和重組過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。它們的主要功能是連接DNA鏈上的磷酸二酯鍵，形成完整的DNA雙鏈。這一過程對(duì)于維持基因組的完整性和穩(wěn)定性至關(guān)重要。DNA連接酶的基本作用原理是通過催化DNA鏈的連接，以形成連續(xù)的磷酸二酯骨架。連接過程通常包括以下三個(gè)步驟：（1）底物識(shí)別DNA連接酶識(shí)別DNA分子中需要連接的兩個(gè)斷裂部位(通常是5'末端和3'末端)。（2）磷酸基團(tuán)的激活在連接前，DNA連接酶通常需要結(jié)合ATP(腺苷三...

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