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原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)主要區(qū)別是什么？

你知道原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)主要區(qū)別是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)即第一次培養(yǎng)，是指將培養(yǎng)物放置在體外生長(zhǎng)環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng)，中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過(guò)程。有幾方面含義：1.養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)器皿（瓶）中就不再分割，任其生長(zhǎng)繁殖；2.原代培養(yǎng)中的“代”并非細(xì)胞的“代”數(shù)，因?yàn)榕囵B(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞經(jīng)多次分裂已經(jīng)產(chǎn)生多代子細(xì)胞；3.原代培養(yǎng)過(guò)程中不分割培養(yǎng)物不等于不更換培養(yǎng)液，也不等于不更換培養(yǎng)器皿。正常細(xì)胞培養(yǎng)的世代數(shù)有限，只有癌細(xì)胞和發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞才能無(wú)限生長(zhǎng)下去。所謂轉(zhuǎn)...

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細(xì)胞分離技術(shù)和策略是什么？

細(xì)胞分離是將混合細(xì)胞群體中的目標(biāo)細(xì)胞分離出來(lái)的過(guò)程，常用于細(xì)胞治療產(chǎn)品工藝流程中。那么你知道細(xì)胞分離技術(shù)和策略是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、離心法：差速離心：通過(guò)控制離心速度和時(shí)間，利用細(xì)胞的不同沉降速度分離出不同細(xì)胞類型。密度梯度離心：使用密度梯度介質(zhì)（如離心膜過(guò)濾器或離心管）來(lái)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分層和分離，根據(jù)細(xì)胞密度的差異進(jìn)行分離。二、流式細(xì)胞術(shù)：免疫細(xì)胞分選法：利用細(xì)胞表面標(biāo)記物和特定的熒光標(biāo)記物，通過(guò)細(xì)胞與熒光抗體的結(jié)合來(lái)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分選和分離。磁珠分離法：通過(guò)將特定靶向...

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RNA提取的操作關(guān)鍵點(diǎn)在哪？

RNA是目前發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)生物功能zui豐富多樣的生物大分子，同時(shí)是DNA與蛋白質(zhì)信息傳遞的橋梁，因此完整RNA的提取和純化是功能基因組時(shí)代的重要手段。那么你知道RNA提取的關(guān)鍵點(diǎn)在哪嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！所有RNA的提取過(guò)程中都有五個(gè)關(guān)鍵：①樣品細(xì)胞或組織的有效破碎；②有效地使核蛋白復(fù)合體變性解離，釋放出RNA；③對(duì)RNA酶的有效抑制；④有效地將RNA從DNA和蛋白質(zhì)混合物中分離；⑤對(duì)于多糖含量高的樣品還要采取措施有效去除多糖雜質(zhì)。但其中最關(guān)鍵的是抑制RNA酶的活性。RNA酶...

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RNA提取的原理是什么？

不同組織RNA提取原理是將細(xì)胞裂解，釋放出RNA，并通過(guò)不同方式去除蛋白，DNA等雜質(zhì)，最終獲得高純度RNA產(chǎn)物的過(guò)程。常用的RNA提取方法是Trizol方法，Trizol內(nèi)含異硫氰酸胍能迅速破碎細(xì)胞，同時(shí)使核蛋白復(fù)合體中的蛋白變性并釋放出核酸，由于釋放出的DNA和RNA在特定pH值下的溶解度不同，且分別位于中間相和水相，從而使DNA和RNA得到分離，取出水相后，通過(guò)有機(jī)溶劑(氯仿)抽提及異丙醇沉淀，可得到純凈RNA。那么你知道RNA提取的原理是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一...

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如何解決病毒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的常見(jiàn)問(wèn)題？

病毒轉(zhuǎn)染是指將外源病毒導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)，用病毒將帶有目的基因的載體整合到細(xì)胞的基因組中，以達(dá)到長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)目的基因的目的，那么你知道該如何解決病毒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的常見(jiàn)問(wèn)題嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、轉(zhuǎn)染效率低可能是由于病毒感染的細(xì)胞數(shù)量不足、濃度太低、轉(zhuǎn)染時(shí)間過(guò)短、細(xì)胞質(zhì)量差等原因?qū)е??？梢試L試增加病毒的濃度和轉(zhuǎn)染時(shí)間，或者優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)條件來(lái)提高轉(zhuǎn)染效率。解決方法：優(yōu)化病毒載體和轉(zhuǎn)染劑的選擇和使用方法，調(diào)整細(xì)胞的培養(yǎng)條件和密度，增加轉(zhuǎn)染時(shí)間和濃度等操作方案。二、細(xì)胞毒性病毒轉(zhuǎn)染過(guò)...

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