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MLPA試驗步驟

在上篇MLPA試驗原理中，我們已經(jīng)詳細介紹了MLPA技術(shù)。MLPA，即多重連接探針擴增技術(shù)，是一種分子生物學技術(shù)，用于檢測基因的拷貝數(shù)變異和序列變異。它結(jié)合了PCR（聚合酶鏈式反應(yīng)）和連接酶技術(shù)，通過設(shè)計特定的探針來識別和擴增目標DNA序列。下面讓我們一起來看看MLPA的試驗步驟吧！MLPA試驗步驟分為六步：變性、雜交、連接、PCR擴增、片段分離、數(shù)據(jù)分析。一、變性將DNA標本放入PCR儀中加熱5分鐘，使DNA雙鏈解鏈成單鏈。純化的樣本DNA被變性。二、雜交加入雜交反應(yīng)液。雜...

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MLPA試驗原理

MLPA技術(shù)，即多重連接探針擴增技術(shù)，于2002年首先報道，是近幾年發(fā)展起來的一種針對待檢DNA序列進行定性和半定量分析的新技術(shù)。該技術(shù)高效、特異，在一次反應(yīng)中可以檢測45個核苷酸序列拷貝數(shù)的改變，已經(jīng)應(yīng)用于多個領(lǐng)域、多種疾病的研究。下面讓我們一起來看看MLPA技術(shù)的試驗原理吧！在MLPA實驗中，純化的樣本DNA被變性。之后用MLPA探針寡核苷酸孵育過夜。每個MLPA探針都具有針對特定基因組序列的探針。每對MLPA探針包括兩條單鏈DNA:左側(cè)探針和右側(cè)探針寡核苷酸。簡稱分別是...

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非預染蛋白Marker和預染蛋白Marker的區(qū)別

蛋白Marker被稱為蛋白質(zhì)質(zhì)量標定劑，是一種由已知分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)混合物構(gòu)成的，類似于"尺寸"的工具，用于指示蛋白質(zhì)條帶的大小。下面讓我們一起來看看非預染蛋白Marker和預染蛋白Marker的區(qū)別吧！非預染蛋白Marker：是幾種已知分子量并純化好的蛋白質(zhì)預混液，方便不同大小的蛋白比較。非預染的Marker使用上不如預染Marker好用，因為電泳過程中看不到，電泳結(jié)束后經(jīng)過蛋白染色后才能起指示作用，無法在實驗過程中起預示參照作用，屬于“后知后覺”型的。但是由于蛋白沒有附帶...

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常見緩沖液有什么

常見緩沖液有什么實驗室中常常使用的各類溶液種類繁多，且配制方法五花八門，是否挑花眼了呢?本文總結(jié)了近三十種常用溶液、緩沖液、培養(yǎng)基的配制方法，涵蓋了分子生物學、蛋白分析、細胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)等各個領(lǐng)域。下面讓我們一起來看看常見緩沖液有什么吧！一、蛋白電泳緩沖液蛋白電泳緩沖液種類非常之多，需要根據(jù)凝膠體系來進行選擇。凝膠系統(tǒng)為Tris-甘氨酸體系時，可選擇Tris-甘氨酸電泳緩沖液，凝膠系統(tǒng)為Bis-Tris體系時，可選擇MES或MOPS緩沖液，當凝膠系統(tǒng)為Tris-trici...

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DNA的提取方法

DNA的提取方法DNA的提取可以簡單的分為裂解和純化兩大步驟，裂解是破壞樣品細胞結(jié)構(gòu)，從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過程，純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分，如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)徹d分離的過程。下面讓我們一起來看看DNA的提取方法都有什么吧！一、高鹽沉淀法高鹽沉淀法是酚氯仿抽提方法的一種變體，它簡化了酚氯仿抽提的繁瑣操作，并克服了其缺點，只是得到的DNA純度不夠穩(wěn)定。二、酚氯仿抽提法酚氯仿抽提是一種有效的蛋白質(zhì)去除方法，但如果裂解體系中的蛋白質(zhì)含量超過了其飽和度...

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